通過 VIDEODROP 評估 LNP 濃度示例分析

發(fā)布時間：2024-12-01　點擊量：444

通過 VIDEODROP 評估 LNP 濃度示例分析

使用 VIDEODROP 進行 LNP 分析

VIDEODROP 是一種基于干涉原理的創(chuàng)新納米級成像技術(shù)，能夠在短時間內(nèi)以高重復性測量納米顆粒的尺寸和濃度。

OneDrop & OneClick 實時測量
高再現(xiàn)性最大限度地減少測量儀之間的誤差
按原樣測量未純化和未標記的樣品

粒徑、分散狀態(tài)、zeta 電位等是核酸藥物評價中的重要理化參數(shù)，但使用 VIDEODROP 的單顆粒測量技術(shù)監(jiān)測顆粒濃度使其變得不那么復雜，可以收集數(shù)據(jù)以幫助標準化質(zhì)量控制，在執(zhí)行測定步驟之前進行穩(wěn)定性評估和比較研究，并在新配方開發(fā)、制造工藝和儲存條件中有效比較顆粒計數(shù)。
因此，我們將使用VIDEODROP來比較不同條件下mRNA-LNP顆粒的數(shù)量，并重點介紹過程或脂膜成分對轉(zhuǎn)染活性的影響的測量結(jié)果。

圖 1. VIDEODROP 如何用于 mRNA-LNP 生產(chǎn)的圖片

LNP 顆粒濃度很重要的過程

使用 mRNA-LNP 制造納米藥物時需要評估多個項目。
在這里，我們將針對以下四點檢查 VIDEODROP 測量和流式細胞儀對不同制造條件的樣品的測量：（1）用于合成 LNP 的試劑類型，（2）混合 LNP 和 RNA 的速度，（3）損失由于緩沖液更換，以及（4）由于儲存條件造成的損失，我們比較了所使用的核酸遞送測定的結(jié)果，并評估了每個步驟中濃度測量的重要性。

分析結(jié)果顆粒濃度是否影響轉(zhuǎn)染活性？

脂質(zhì)成分的優(yōu)化

在該實驗中，使用相同的工藝制造了兩種具有不同脂質(zhì)成分的LNP，并對每個樣品進行了測量。
顆粒濃度不受脂質(zhì)組合物的影響，但脂質(zhì)組合物 1 與脂質(zhì)組合物 2 相比顯示出更高的活性。盡管顆粒數(shù)量幾乎相同，脂質(zhì)組合物1比脂質(zhì)組合物2更有效。

混合速度優(yōu)化

在這里，作為混合速度的優(yōu)化評估，我們通過改變微流體裝置上的混合速度（流速）從 2 到 18 mL/min 來比較 LNP 的濃度和轉(zhuǎn)染活性。
盡管 LNP 本身的組成相同，但改變混合速度對顆粒濃度和轉(zhuǎn)染活性有顯著影響。它與粒子數(shù)有直接關(guān)系。